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Hoechst染色:hoechst可以穿過活細胞膜與細胞核結合(主要為凋亡活細胞)在紫外光下將核染為藍色.Hoechst染細胞核會影響共聚焦顯微鏡對該樣本其他熒光的觀察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258兩種hoechsts33258, hoechst33342二者區別不大,但是hoechst33342對細胞的毒性作用更小一些,所以-般來說hoechsts33258用于細胞固定后再染色,而hoechst33342則可以對活細胞直接進行染色!
PI (Propidium Iodide 碘化丙啶)染色:是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,常用于細胞凋亡檢測.碘化丙啶(Propidium Iodide, PD是- -種核酸染料(紅色),它不能透過完整的細胞膜,但調亡中晚期的細胞和壞死細胞由于細胞膜通透性的增加,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅.用PI單一染色觀測培養細胞, 只能表示細胞的壞死情況,而不是凋亡( 當然晚期凋亡PI亦可著色)。但是如果您只是想知道細胞的死亡情況,而不是仔細區分壞死或凋亡,那么PI單一染色也可以。但是如果您一定要認定細胞的調亡,那么PI單一染色顯然不夠!
annexin-V染色(se)細(xi)(xi)胞(bao)凋亡早期,細(xi)(xi)胞(bao)膜標志發(fa)生改變其(qi)中,磷(lin)脂酰絲氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的條件下與其(qi)高親(qin)和力特異性(xing)結合(he).這樣,Annexin-v染色(se)陽性(xing),表示(shi)細(xi)(xi)胞(bao)處(chu)于早期凋亡狀態.Annexin-V結合(he)不(bu)同(tong)的熒(ying)光(guang)抗體,就可以利(li)用流式細(xi)(xi)胞(bao)儀、熒(ying)光(guang)顯微鏡以及共聚焦激光(guang)掃描顯微鏡檢測細(xi)(xi)胞(bao)凋亡的發(fa)生。Annexin V用FITC標記(ji)發(fa)綠色(se)熒(ying)光(guang);如果用PE標記(ji)就發(fa)紅色(se)熒(ying)光(guang)。
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